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產(chǎn)品名稱:羥脯氨酸(HYP)含量檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:BC0250

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:羥脯氨酸(HYP)含量檢測試劑盒
測定意義:HYP是機(jī)體膠原蛋白主要成分之一,膠原蛋白大多分布于皮膚、腱、軟骨和血管等,因此HYP含量是反映膠原組織代謝及纖維化程度的一項重要指標(biāo)。
測定原理:樣品經(jīng)水解產(chǎn)生游離的HYP,進(jìn)一補(bǔ)被氯胺T氧化,氧化產(chǎn)物與對二甲氨基苯j(luò)ia醛反應(yīng),產(chǎn)生紅色化合物,在560nm處有特征吸收峰。通過測定樣品水解液560nm吸光值,可計算HYP含量。

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BC0250羥脯氨酸(HYP)含量檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

羥脯氨酸(HYP)含量檢測試劑盒

HYP 是機(jī)體膠原蛋白主要成分之一,膠原蛋白大多分布于皮膚、腱、軟骨和血管等,因此 HYP 含量是反映膠原組織代謝及纖維化程度的一項重要指標(biāo)。樣品經(jīng)水解產(chǎn)生游離的 HYP,進(jìn)一補(bǔ)被氯胺 T 氧化,氧化產(chǎn)物與對二甲氨基苯j(luò)ia醛反應(yīng),產(chǎn)生紅色化合物,在 560nm 處有特征吸收峰。通過測定樣品水解液 560nm 吸光值,可計算 HYP 含量。

 

一、羥脯氨酸提?。?1. 組織:取約 0.5g 樣品于玻璃管,加入 5mL 的組提取液,置于 110℃烘箱,水解 6 12 小時,16000rpm,25℃,離心 20min,用提取液定容 5mL,取上清待測。 2. 細(xì)胞:取約 500 萬個細(xì)胞,加入 2mL 的細(xì)胞提取液,于高壓消毒器中 15 磅保持 30min,自然降壓后待測。二、測定操作:對照管 測定管樣本(mL) 0.2 試劑一(mL) 0.2 0.2 混勻,室溫靜置 20min 試劑二(mL) 0.2 0.2 H2O(mL) 0.6 0.4 混勻,60℃,20min,取出后室溫靜置 15 min,測定 A560。(A560=A 測定-A 對照) 羥脯氨酸含量計算:標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=64.875x+ 0.0251,R 2=0.9991 (1)按組織計算 HYP 含量(mg/g) =(A560-0.0251)÷64.875×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W) =0.385×(A560-0.0251)÷W (3)按細(xì)胞計算: HYP 含量(mg/10 4cell)= (A560-0.0251)÷64.875×V 反總÷V 樣×V 樣總÷細(xì)胞數(shù)量(萬個) =0.154×(A560-0.0251)÷細(xì)胞數(shù)量(萬個) V 反總:反應(yīng)體系總體積,1mL; V 樣:反應(yīng)中樣本體積,0.2mL;V 樣總:加入提取液體積,mL; W:樣本質(zhì)量,g。

羥脯氨酸(HYP)含量檢測試劑盒

組織提取液:6mol/L 鹽酸,自備。濃鹽酸:H2O(V/V)= 1:1,室溫保存;細(xì)胞提取液:液體 100mL×1 瓶,4 ℃保存;試劑一:液體 10mL×1 瓶,4 ℃避光保存;試劑二:液體 10mL×1 瓶,4 ℃避光保存。

 相關(guān)文獻(xiàn):

《Enhancement of the chondrogenic differentiation of mesenchymal stem cells and cartilage repair by ghrelin》 作者:Litong Fan  Jiaqing Chen  Yanmeng Tao  Boon Chin Heng  Jiakuo Yu  Zheng Yang  Zigang Ge 期刊:Wiley Online Library 影響因子: PMID:30644571

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