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苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品英文名： Micro Phenylalanine Ammonia-lyase (PAL) Assay Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：BC0215                   產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣               產(chǎn)品商標(biāo)：Solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存      參考價(jià)格：1280
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                      
關(guān)鍵字：苯丙氨酸解氨酶試劑盒
簡(jiǎn)要介紹：PAL（EC4. 3 1 5）廣泛存在于各種植物和少數(shù)微生物中，是植物體內(nèi)苯丙烷類代謝的關(guān)鍵酶，與一些重要的次生物質(zhì)如木質(zhì)素、異黃酮類植保素、黃酮類色素等合成密切相關(guān)，在植物正常生長(zhǎng)發(fā)育和抵御病菌侵害過(guò)程中起重要作用。

產(chǎn)品詳細(xì)介紹
產(chǎn)品內(nèi)容： 
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 15mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前每瓶加入 4mL 雙蒸水充分溶解待用，可 4℃保存一周。
試劑三：液體 1mL×1 瓶，4℃保存。
產(chǎn)品說(shuō)明：
PAL（EC4.315）廣泛存在于各種植物和少數(shù)微生物中，是植物體內(nèi)苯丙烷類代謝的關(guān)鍵酶和 限速酶，在動(dòng)物體內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)。與一些重要的次生物質(zhì)如木質(zhì)素、類黃酮類植保素、黃酮類色素等 合成密切相關(guān)，在植物正常生長(zhǎng)發(fā)育、抗病、抗逆反應(yīng)中起重要作用。 PAL 催化 L-苯丙氨酸裂解為反式肉桂酸和氨，反式肉桂酸在 290nm 處有大吸收值，通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率計(jì)算 PAL 活性。
所需的儀器和用品 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研 缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提取 稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液進(jìn)行冰浴勻漿。10000g4℃離心 10 分鐘，取上清，置冰上待測(cè)。
二、測(cè)定步驟
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng) 290nm，蒸餾水調(diào)零。
2、在 EP 管或 96 孔板中按順序加入下列試劑

混勻，靜置 10min 后，290nm 處記錄測(cè)定管吸光值 A1 和對(duì)照管吸光值 A2，△A=A1-A2。 注意：對(duì)照管只要做一管 PAL活性計(jì)算

用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下 
（1） 按蛋白濃度計(jì)算 單位的定義：每 mg 組織蛋白在該反應(yīng)體系中每分鐘使 290nm 下吸光值變化 0.1 定義為一個(gè)酶活性 單位。 PAL（U/mgprot）=ΔA×V 樣總÷V 樣÷0.1÷T÷Cpr=66.7×ΔA÷Cpr
（2） 按按樣本鮮重計(jì)算 單位的定義：每 g 組織在該反應(yīng)體系中分鐘使 290nm 下吸光值變化 0.1 定義為一個(gè)酶活性單位。 PAL（U/g 鮮重）＝ΔA×V 樣總÷V 樣÷0.1÷T÷W=66.7×ΔA÷W V 樣：加入樣本體積，5µL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間，30min；Cpr：樣本 蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量。
 用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
（1） 按蛋白濃度計(jì)算 單位的定義：每 mg 組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘使 290nm 下吸光值變化 0.05 定義為一個(gè)酶活性單 位。 PAL（U/mgprot）=ΔA×V 樣總÷V 樣÷0.05÷T÷Cpr=133.4×ΔA÷Cpr
（2） 按按樣本鮮重計(jì)算 單位的定義：每 g 組織在反應(yīng)體系中每分鐘使 290nm 下吸光值變化 0.05 定義為一個(gè)酶活性單位。 PAL（U/g 鮮重）＝ΔA×V 樣總÷V 樣÷0.05÷T÷W=133.4×ΔA÷W V 樣：加入樣本體積，5µL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間，30min；Cpr：樣本 蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量。

相關(guān)文獻(xiàn)：

《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li，Yang Ding，Xiuli Tang，Guoyi Wang，Shujuan Wu，Xianxian Li，Xiaofei Huang，Tongtong Qu，Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影響因子:3.032 PMID:

苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性檢測(cè)試劑盒