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甘油三酯(TG)含量檢測(cè)試劑盒

操作步驟：

一、 TG 的提取：

1、 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿，8000g，4℃離心10min，取上清待測(cè)。

2、 細(xì)胞、細(xì)菌：先收集 400-500 萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，加 1mL 試劑一，超聲波破碎 1min（強(qiáng)度 20％，超聲 2s，停 1s），8000g， 4℃離心 10min，取上清待測(cè)。

3、 血清（漿）等液體樣品：直接測(cè)定。

二、 測(cè)定操作：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 420 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 水浴鍋預(yù)熱到 65℃?？瞻坠?標(biāo)準(zhǔn)管 測(cè)定管雙蒸水（μL） 40 標(biāo)準(zhǔn)液（μL） 40 TG 待測(cè)液（μL） 40 試劑一（μL） 125 125 125 試劑二（μL） 25 25 25 加試劑一后充分混勻，再加試劑二，劇烈振蕩 30s，靜置，待分層后取上層溶液 30μL，置于新的 EP 管中。

3．甘油三酯含量測(cè)定：空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 測(cè)定管上層溶液（μL） 30 30 30 試劑三 （μL） 100 100 100 試劑四（μL） 30 30 30 充分混勻，65℃水浴 3min 試劑五（μL） 100 100 100 試劑六（μL） 100 100 100 充分混勻，65℃水浴 15min 取出 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板測(cè)定 420nm 處吸光度，記為 A 空，A 標(biāo)和 A 測(cè)。注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

甘油三酯(TG)含量檢測(cè)試劑盒

a.使用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

1. 血清（漿）中甘油三酯含量： TG 含量（mg/dL）=C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）×100 mL =100×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空） C 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL；100mL：血清體積，1dL=100 mL。

2. 組織中甘油三酯含量： (1)按樣本蛋白濃度計(jì)算 TG 含量（mg/ mg prot）= C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷Cpr =（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷ Cpr (2)按樣本質(zhì)量計(jì)算 TG 含量（mg/ g）=C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷W =（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷ W C 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL ；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g/mL

3. 細(xì)胞、細(xì)菌中甘油三酯含量： TG 含量（mg/104 cell）=C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷細(xì)菌或細(xì)胞（104 cell /mL） =（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷細(xì)菌或細(xì)胞（104 cell /mL） C 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL。

b.使用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

1. 血清（漿）中甘油三酯含量： TG 含量（mg/dL）=C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）×100 mL =100×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空） C 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL；100mL：血清體積，1dL=100 mL。

2. 組織中甘油三酯含量： (1)按樣本蛋白濃度計(jì)算 TG 含量（mg/ mg prot）= C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷Cpr =（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷ Cpr (2)按樣本質(zhì)量計(jì)算 TG 含量（mg/ g）=C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷W =（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷ W C 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL ；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g/mL

3. 細(xì)胞、細(xì)菌中甘油三酯含量： TG 含量（mg/104 cell）=C 標(biāo)準(zhǔn)品×（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷細(xì)菌或細(xì)胞（104 cell /mL） =（A 測(cè)－A 空）÷（A 標(biāo)－A 空）÷細(xì)菌或細(xì)胞（104 cell /mL） C 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中有易揮發(fā)性物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)過程中需佩戴手套和口罩，試劑瓶蓋打開后應(yīng)該及時(shí)蓋緊。

2. 加試劑二后需劇烈震蕩，使待測(cè)液中甘油三酯得到充分提取。

3. 檢出限為 100μ mol/L。

試劑一：自備，取玻璃空瓶，加入 45mL 正庚烷，80mL 異丙醇，蓋緊后混勻，4℃保存。

劑二：液體 3mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體 10mL×1 瓶，4℃保存。

試劑四：液體 3mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑五：液體 10mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑六：液體 10mL×1 瓶，4℃避光保存。標(biāo)準(zhǔn)品：液體 5mL×1 瓶，1mg/mL 甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，4℃保存。

相關(guān)文獻(xiàn):

《Correlations of MMP-1, MMP-3, and MMP-12 with the degree of atherosclerosis, plaque stability and cardiovascular and cerebrovascular events》 作者:WEI HU, RUI WEI, LIYUE WANG, JINGQIAN LU,HONGMING LIU and WEI ZHANG 期刊:EXPERIMENTAL AND THERAPEUTIC MEDICINE  影響因子:1.448 PMID:29434795
《Strontium ranelate-induced anti-adipocytic effects are involved in negative regulation of autophagy in rat bone marrow mesenchymal stem cells》 作者:Zhenbin Xu,Xizhuang Bai 期刊:International Orthopaedics 影響因子:2.384 PMID:29717341
《Correlations of chemokine CXCL16 and TNF-α with coronary atherosclerotic heart disease》 作者:Jieyong Xing Yanshao Liu Tao Chen 期刊:Experimental and Therapeutic Medicine 影響因子:1.448 PMID:29399085